囊胚期胚胎二次冷冻复苏移植1例的出生结局和儿童胚胎情况随访

体肝细胞的浓缩保留是来进行生为殖技心法(ART)简化疗里面的不可或缺三组已成部分，通过浓缩保留可以将病患过多的体肝细胞保留下来，进一步提高病患的累积孕期不下。体肝细胞的 浓缩保留可以在体肝细胞退简化的取值收尾顺利进行，如有的的里面心除此以外浓缩脱氧核糖核酸期体肝细胞或蝌蚪裂期体肝细胞，现在随着雅养不止来体系的完善，越来越多的IVF的里面心顺利进行幼体雅 养以期进一步提高孕期不下和增高多绒毛孕期不下，因此科学实证极其排斥于顺利进行幼体浓缩保留。浓缩方法有可以为程序 简化慢速浓缩，也可以为金属在浓缩。我们的里面心自 2004年起，对第3天移植版后的体肝细胞全部顺利进行幼体雅养不止来，如有幼体已成型则顺利进行金属在浓缩保留。然而在医学实习里面常依赖于一些偶发的车祸看来会，如病患在转变移植版日因猝死性原因无法顺利进行体肝细胞移植版，只能将转变的体肝细胞取走或旋即浓缩后择期转变移植版。但是我们无法显然定幼体二次金属在浓缩后的可用性如何。目之前关于生命体体肝细胞二次浓缩的古籍较少，尽管有古籍刊道了一些病症都能在体肝细胞二次浓缩转变移植版后获活产，但这些刊道多为第一次浓缩为脱氧核糖核酸 期体肝细胞或蝌蚪裂期体肝细胞，转变后雅养不止来至幼体旋即浓缩[1。4]。Kumasako等[3]确信二次浓缩不会增高胚 绒毛的农作物不下，但是关于幼体浓缩转变后旋即浓缩改 苏移植版的刊道极少。且据我们所知，已为科学研究来分 析置幼体二次金属在浓缩转变移植版后的不止生为于结尾。在 此病症刊道里面，我们阐述了幼体二次浓缩转变移植版 后新生为儿的不止生为于结尾，并对此病患的夫妻俩顺利进行长时间 随访掩蔽，详细记录了此已成年人的身型退简化看来会。一、医学参考资料病患34岁，丈夫35岁，因腹腔因素原发不育 到我院生为殖的里面心住院治疗，不育年内6年。根据世界卫 生为三民间组织标准，男方参数短时间。病患2005年在本 的里面心顺利进行蝌蚪巢激发后取蝌蚪，在取蝌蚪长周期所采行的促 排蝌蚪建议按照本的里面心的除此以外顺利进行，在上一长周期的白 体期开始应用促性腺激素释放激素选择性(GnRH-a)，当脑垂体大幅提高再降调节后，用蝌蚪泡激发素(FSH，果纳芬，默克)顺利进行蝌蚪巢激发。当核心人物蝌蚪泡直径大幅提高18～ 20 rnlTl时，注射人绒毛膜促性腺激素(HCG，艾泽，默克)，38 h后顺利进行超声引导的蝌蚪泡穿刺来获取蝌蚪母肝细胞。共计获13枚蝌蚪母肝细胞，顺利进行除此以外授精后， 13枚蝌蚪母肝细胞卵子，在卵子后第3天掩蔽体肝细胞的蝌蚪裂看来会，筛选2枚优质体肝细胞顺利进行移植版。移植版后剩余的 11枚蝌蚪裂期体肝细胞经病患知情拒绝后全部顺利进行幼体雅养不止来，在卵子后第5日或第6日分别掩蔽幼体已成型看来会及形态。采行Gardner评分系统设计对幼体顺利进行评分，该病患共计已成型2枚幼体，幼体评分分别为4BB和4BC。将所已成型的幼体按照我的里面心除此以外方法有[5]顺利进行金属在浓缩，确切操为：幼体浓缩之前顺利进行人工皱缩，即用激光 系统设计在临近内肝细胞团的滋养肝细胞连接较弱西南侧原子笔，让囊腔液流不止，使肝细胞皱缩已成团；然后将幼体装入含有7．5％DMSO和7．5％乙二醇的预均衡液里面均衡 2 min，以后移入金属在浓缩液里面均衡30 s，将体肝细胞转 迁至浓缩环(cryoloop环)上，直接放进氟简化氢保留。 病患食材长周期移植版未获孕期，取蝌蚪3个年底后患 者顺利进行浓缩幼体转变移植版。人工长周期准备小肠，子宫 第2"-4天行除此以外B超健康检查，获二甲基雌二醇(补佳乐，先灵，瑞士)制剂，制剂剂量根据病患基本上的小肠看来会 变更(2～18 rag／d)。B超监测小肠生为长看来会，当小肠粗 度大幅提高8 ITlln时透析置白体酮(20 rng×2 d，40 mgX 2 d，20---一40 mg×1 d)，注射后第6天行幼体转变移植版。移植版之前1 d按照我的里面心除此以外方法有[5]顺利进行幼体转变：准备幼体转变液，在体肝细胞雅养不止来皿内除去0．33 mol／L、0．2 mol／L蔗糖氢氧化钾和基础雅养不止来液(GMoPS Plus， Vitrolife，瑞典)，从氟简化氢里面取不止带上有幼体的浓缩环，热气 里面停留5 S后，将体肝细胞依次放进上述转变液里面，时间分 别为2 min、3 min和5 min。转变后的2枚幼体均顺利进行 激光来进行无齿简化，同样在临近肝细胞团的薄膜带上上部位切割薄膜带上的1／4约。以后将幼体移人提之前准备好的 幼体雅养不止来液(G2，ⅥnDlife，瑞典)里面，放于37℃、6％OQ 和5％Q雅养不止来装满雅养不止来16 h。移植版之前掩蔽幼体的扩展到 和无齿不止看来会。 该病患在幼体转变移植版日猝死急性阑尾炎不会 顺利进行幼体移植版，在病患知情拒绝的之假定下旋即按照上述幼体金属在浓缩操作步骤顺利进行体肝细胞浓缩。病患手 心法6个年底后旋即顺利进行浓缩幼体转变移植版，确切操作步骤同上，幼体转变后16 h顺利进行移植版，病患取得已成功孕期，并于孕38周产妇一健福夫妻俩，体长52 CITI，BMI3 550 g。 由于这是本的里面心第1则有幼体二次浓缩的病患，所以我们对其女顺利进行了长时间的随访。夫妻俩的父亲腰围为 185 cm，母亲腰围为167 cm夫妻俩1岁时，腰围83 cm， BMI12 kg；3岁时，腰围97cm，BMI21kg，身躯健 福，无病因；5岁时，腰围117 cm，BMI31 kg；7岁时，腰围135cm，BMI40 kg；9岁时腰围154cm，BMI50 kg；12岁时，腰围168 cm，BMI62 kg；10岁时，不止现退简化；12岁时子宫风湿热。该男人性格开朗，参加学校管乐队、校校队等有组织社区活动，并取得不太好的总分，其智力短时间，修习总分在高中学生为之前5名。二、讨论在此病症里面，病患获13枚已成熟蝌蚪母肝细胞，13枚蝌蚪母肝细胞卵子，经过雅养不止来后已成型2枚幼体并玻璃 简化浓缩保留。病患在按计划幼体转变移植版日猝死急性阑尾炎，在其知情拒绝的之假定下将转变后的幼体旋即浓缩保留。此为医学实习里面一些难以避免的看来会。如果将病患体肝细胞取走极其终究，而体肝细胞旋即浓缩保留 的可用性尚不明显然。到目之前为止，虽然已经有一些胚 绒毛在二次浓缩后获活产的病症刊道，但都是第一次 体肝细胞浓缩据传脱氧核糖核酸期或蝌蚪裂期体肝细胞，转变后雅养不止来至幼体收尾旋即浓缩。本科学研究是首次对幼体二次金属在 浓缩后获的活产顺利进行长时间随访的病症刊道。 有学者曾经用肠道体肝细胞科学研究反改浓缩转变对体肝细胞的因素，他们推断出与未浓缩的体肝细胞相比，浓缩体肝细胞 在无齿不止时的肝细胞数额少，且肠道体肝细胞都能在取得已成功的 反改浓缩转变3次后基本上不具备体除此以外退简化能力也[6]。在此病症里面，我们对比了两次浓缩之前后幼体的形态学巨大变简化，第1次浓缩是在第5天，幼体为4期，群众运动速度为 4BB，第一次转变后雅养不止来16 h，幼体实质上无齿不止，视作 6期幼体，群众运动速度为6BB；第2次浓缩转变后，雅养不止来16 h 幼体群众运动速度为6BB。幼体形态从除此以外观看，两次浓缩后 没相同之西南侧种，幼体肝细胞存活良好，貌似幼体收尾体肝细胞的 二次金属在浓缩对体肝细胞的退简化无太大因素。分析置方法有原 因，我们确信看来与表列出几个全面性有关。首先，幼体在浓缩以后顺利进行了激光皱缩，将幼体腔内液全部放 不止，使幼体腔裂开，待幼体实质上皱缩后再行顺利进行幼体的 金属在浓缩，这样都能减少浓缩过程里面冰晶的已成型， 增高对体肝细胞的烧伤。有科学研究也证实幼体的人工皱缩 都能有效进一步提高幼体浓缩后转变的存活不下[7-9]。而且浓缩幼体转变后的来进行无齿简化也极其不可或缺，在体肝细胞浓缩过程里面，生命体幼体的薄膜带上变硬，会允许体肝细胞的向除此以外无齿 不止，有科学研究确信幼体在扩展到过程里面不断地衰减皱缩， 如果在薄膜带上不止口西南侧托的周内多了，幼体就会衰亡[10]。而且，浓缩转变后的幼体，由于刚刚转变后囊 胚腔还正西南侧于皱缩实质上，体肝细胞和薄膜带上彼此间的间隙显然 等于蝌蚪裂期体肝细胞的间隙，因此幼体的来进行无齿简化极其必要。我们的数据推断出，未经过来进行无齿简化的幼体，转变后投宿雅养不止来，实质上无齿不止的比则有(340A)少额高于激光无齿简化后的幼体(85％)，极其高的无齿不止比则有意味着极其高的着床 良机。其次，幼体的浓缩保留不同于蝌蚪裂期体肝细胞，它 自身有很多优点。都能退简化至幼体收尾的体肝细胞经过 二次同样，退简化能力也异种常的体肝细胞已经被淘汰；幼体的 肝细胞数目多，尤其是滋养肝细胞层肝细胞，烧伤后修改能力也最弱，少数增殖后对体肝细胞退简化能力也因素小；幼体 的肝细胞极其小，排列已成梭形，颗粒／重量比大，对甲醛、改水造已成的重量巨大变简化耐受极其佳[11]。因此我们传言幼体 二次浓缩后肝细胞没烧伤的原因看来与此有关。 目之前虽然有一些体肝细胞二次浓缩获活产的刊 道，但是对新生为儿长时间随访的刊道极其少见。在此病症里面，幼体经过二次金属在浓缩后，基本上都能取得已成功 农作物，病患在足年底产妇一短时间BMI的新生为儿，也示意 幼体二次浓缩看来这不因素新生为儿的不止生为于结尾。改习古籍，我们推断出在2011年的一项小型科学研究里面，作 者分析置方法有了一次浓缩和二次浓缩后体肝细胞不止生为于结尾的一比 异种[12]。在文里面一次浓缩，就是将2PN期或蝌蚪裂期的体肝细胞顺利进行浓缩保留，转变后移植版；二次浓缩指的是 浓缩的体肝细胞转变后顺利进行体除此以外雅养不止来至幼体收尾，再行进 行浓缩。结果示意二次浓缩三组的双绒毛不下额高于一次浓缩三组，他们确信是二次浓缩三组移植版的体肝细胞数较少造 已成的。此科学研究还示意二次浓缩三组的不止生为于BMI额高于 一次浓缩三组，尽管没统计学相同之西南侧种；在二次浓缩三组未 愈演愈烈所谓异种常，在一次浓缩三组愈演愈烈1则有所谓异种常；两 三组均未愈演愈烈死绒毛或新生为儿死亡。尽管这些并非幼体 二次浓缩的科学研究，但从一定程度上反映了体肝细胞在二 次浓缩后这不因素新生为儿的不止生为于结尾。我们对此新 生为儿随访至9岁，该已成年人身型退简化短时间，智力退简化正 常，人际关系退简化短时间。与以后冻融体肝细胞移植版(FET)不止 生为已成年人的随访结论一致[13,7]。Pelkonen等分析置方法有 了FET不止生为于夫妻俩的所谓异种常的愈演愈烈看来会，确信 FET不止生为于夫妻俩愈演愈烈所谓异种常的比则有与食材移植版相同，以后Pelkonen等[14]对FET祖辈夫妻俩顺利进行了一 项随访3年的科学研究，推断出FET与食材移植版不止生为于祖辈 的身型退简化是相同的。还有科学研究推断出ART后不止生为于 祖辈的中枢神经系统群众运动退简化全面性与自然孕期祖辈无值得注意一比 异种，确信他们的中枢神经系统退简化、价值观感情及语言修习并无 相同之西南侧种[117]。可见体肝细胞浓缩对新生为儿长时间退简化的遥 响与食材移植版体肝细胞相同。而从我们的病症刊道来 看，幼体的二次浓缩也是相对必要的。 我们将幼体二次金属在浓缩后的体肝细胞顺利进行移植版 后声名鹊起孕期，足年底产妇一健福夫妻俩，并顺利进行为时12年的随访，此已成年人身型退简化短时间，智力退简化短时间，人际关系退简化短时间。确信此幼体二次浓缩后体肝细胞基本上不具备不太好的农作物期望和退简化期望。但此病症仅为个则有刊道，幼体反改浓缩究竟会造已成体肝细胞的烧伤仍不明 显然，移植版反改浓缩的体肝细胞究竟必要还需要必要性的科学研究，因此在医学实习里面，我们仍应尽看来避免体肝细胞的反改冻融。参考古籍额。原始不止西南侧：王雪，甄绿然，孙正怡，郁琦等，幼体期体肝细胞二次浓缩转变移植版1则有的不止生为于结尾和已成年人退简化看来会随访[J],生为殖医学杂志，2018,27(12).